Per venjar-se del seu amic Eisenstein, el Dr. Falke organitza un joc de confusió amb el consentiment del príncep Orlofsky. Hi ha un marquès i un “chevalier”, una comtessa hongaresa i artistes de naixement; però ningú no serà allò que defensa ser. Tot és una mascarada i tot el conjunt acaba a la presó. Finalment, quan totes les màscares cauen i es posen a la llum les infidelitats extramatrimonials, la venjança del ratolí ratpenat ja és evident.